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谷氨酸脱羧酶自身抗体ELISA试剂盒实验是目前应用广酶免疫学技术方法
发布时间:2019-01-11   点击次数:136次
  谷氨酸脱羧酶自身抗体ELISA试剂盒是将抗原的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。在测定中一般要准备合理的计划准备好试剂,ELISA试剂盒在使用前与室温平衡,在温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。满足于生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物实验需求,不用于临床诊断。
  谷氨酸脱羧酶自身抗体ELISA试剂盒实验操作简单、快速、敏感性高、能定性及半微量、微量、超微量定量分析,是目前应用广酶免疫学技术方法。
  谷氨酸脱羧酶自身抗体ELISA试剂盒标本:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
  1)血清:
  室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  2)血浆:
  应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
  仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  3)尿液:
  用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
  4)细胞培养上清:
  A、检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。
  B、检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。
  离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  5)组织标本:
  切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
  加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3087转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
  谷氨酸脱羧酶自身抗体ELISA试剂盒使用注意事项:
  1.ELISA试剂盒检测前,检查各种仪器,打开酶标仪,稳定20分钟左右。
  2.检测样本要澄清,不能含杂物,否则会直接影响结果。
  3.实验开始前要将试剂盒取出,室温放置30-40分钟,使各种试剂都恢复到室温,以使检测结果更为稳定。
  4.尽量做双标准实验,这样可以保证数据的准确性。
  5.底物具有毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,要避免接触。
  6.谷氨酸脱羧酶自身抗体ELISA试剂盒实验中,要使底物避光保存,酶标板均可拆卸,多余的部分应密封好,低温保存。
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